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绝缘子序列通常位于启动子和调控元件之间,具有隔绝其他调控元件对基因的活化或失活效应的功能。在转基因产品开发时,如果能够在插入位置两侧加入绝缘子序列,则可以起到稳定外源基因表达、降低位置效应的作用。在植物中应用最广泛的绝缘子序列就是核骨架/核基质结合区(S/MAR)。
为了挖掘测试有价值的绝缘子序列,研究人员找到了4个绝缘子序列,分别是烟草根特异基因Rb7附近的MAR序列,鸡溶菌酶MAR序列(chiMARs),矮牵牛转化加速序列TBS和拟南芥第四染色体中的MAR序列(AtS/MAR10),其中前3个绝缘子序列之前有过研究。将包含这些绝缘子序列的测试载体转化拟南芥,并测定外源基因表达。结果显示,4个绝缘子序列均能够增强外源基因表达,而只有AtS/MAR10序列还能够降低基因表达的变动幅度。
研究人员还利用全基因组测序的方法分析了侧翼包含绝缘子的T-DNA序列的整合情况,发现chiMARs能够有效的保护T-DNA的插入不受到周围染色质抑制信号的影响。此外,研究者还发现,在含有绝缘子的转化体中,T-DNA区截短和载体骨架插入的频率更高,这表明右边界RB的插入精准度有所降低,不过基因的表达并未因此受到影响。综合所有结果,Rb7序列在增强表达上效果最好,AtS/MAR10序列在降低表达变动幅度上效果最好。